بررسی مورفولوژیکی و ملکولی کیست‌های هیداتید گوسفندان کشتار ی شهرستان مشهد

نوع مقاله : مقاله کامل

نویسندگان

1 گروه پاتوبیولوژی،بخش انگل شناسی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه فردوسی مشهد

2 گروه پاتوبیولوژی، بخش بیوتکنولوژی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه فردوسی مشهد

3 گروه پاتوبیولوژی، بخش انگل شناسی، دانشکده دامپزشکی، دانشگاه فردوسی مشهد

چکیده

کیست هیداتید یکی از بیماری‌های مهم زئونوز در ایران است. کرم اکینوکوکوس گرانولوزوس عامل این بیماری واجد سویه‌های متعددی است. هر یک از سویه‌ها واجد بیولوژی متفاوتی بوده که شناسایی آنها در کنترل بیماری در هر منطقه از اهمیت زیادی برخوردار است. هدف این مطالعه شناسایی سویه‌های اکینوکوکوس گرانولوزوس مولد کیست هیداتید گوسفندان کشتاری با استفاده از روش‌های میکروسکوپی و ملکولی بود. در این مطالعه، کبدها و ریه‌ها آلوده به کیست هیداتید گوسفندان جمع‌آوری و به آزمایشگاه انگل شناسی منتقل گردید. ابتدا پرتواسکلولکس‌های کیست جدا سازی گردید و سپس شاخص‌های مورفولوژیک قلاب‌های روستلوم پروتواسکولکس‌ها با استفاده با عدسی چشمی مدرج اندازه‌گیری شدند.  همچنین DNA پروتواسکولکس هر نمونه  استخراج  شده و آزمایش PCR بر روی ژن ITS-1 انجام شد. سپس محصول PCR توسط آنزیم Bsh1236I مورد هضم آنزیمی قرار گرفت. در این بررسی شاخص‌های مورفولوژیکی قلاب‌های پروتواسکولکس‌ها به ترتیب، طول کلی قلاب بزرگ13/1±48/24 میکرون و طول تیغه‌ی قلاب بزرگ 5/0±27/12 میکرون و طول کلی قلاب کوچک 8/0±4/19 میکرون و طول تیغه‌ی قلاب کوچک 1/1±07/9 میکرون اندازه‌گیری شدند. همچنین الگوی بدست آمده در آزمایش RLFP-PCR امکان وجود هریک از سویه‌های G1,G2,G3 اکینوکوکوس گرانولوزوس را نشان داد. برای تمایز سه سویه از یکدیگر، محصول PCR واجد واکنش، تعیین توالی شدند. آنالیز همردیفی توالی‌های بدست آمده وجود سویه G1 را دراین مطالعه را تایید نمود. بر اساس نتایج بدست آمده، وجود سویه گوسفندی G1 در گوسفندان کشتاری مشهد تایید گردید.

کلیدواژه‌ها

عنوان مقاله [English]

A morphological and molecular study of hydatid cyst in slaughtered sheep in Mashhad area

نویسندگان [English]

  • F. Mirshekar 1
  • Gh. Hashemitabar 2
  • Gh. Razmi 3
1 Department of Pathobiology, Parasitology Section, Faculty of Veterinary Medicine, Ferdowsi University of Mashhad
2 Department of Pathobiology, Parasitology Section, Faculty of Veterinary Medicine, Ferdowsi University of Mashhad
3 Department of Pathobiology, Parasitology Section, Faculty of Veterinary Medicine, Ferdowsi University of Mashhad
چکیده [English]

Hydatid cyst is an important zoonotic diseases the agent of disease is Echinococcus granolusus that have many strains. Each strain has different biology that identification of them is critical for control of hydatid cyst in every region. The aim of study was to identify Echinococcus granolusus strains in slaughtered sheep using morphological and molecular methods in Mashhad area. Many infected liver and lung with hydatid cysts were collected and transferred to laboratory. First, protosclocies of hydatid fluid were isolated, then the morphological characters of rostellar hook protosclocies were examined using light microscope. Thus, DNA of protosclocies in each sample was extracted with commercial Kit. The ITS1 fragments of extracted DNA were amplified by PCR. The PCR product was digested with Bsh1236I enzyme. The size of total length large hooks, length blade of large hooks ,total length small hooks and length blade of small hooks were measured 24.47± 1.13μm, 12.27±0.5 μm, 19.4±0.8 μm and 9.07±0.7 μm, respectively. Based on pattern of PCR-RLFP results, the existence of G1- G3 strains of Echinococcus granolusus were possible. Differentiation of three strains was done using sequencing analysis. The Blast analysis showed the presence of G1 strain in slaughtered sheep. The results was confirmed the presence of G1 strain of Echinoccocus in the slaughtered sheep of Mashhad area.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Hydrated Cyst
  • Morphology
  • Molecular study
  • Strain
  • Sheep

مراجع

1-Ahmadi, N., Dalimi, A.2006.Characterization of Echinococcus granulosus isolates from human, sheep and camel in Iran, Infect. Gen.Evol. 6:85–90.
2- Alvarez Rojas, C.O.A., Romig, T., Lightowlers, M.W.2014. Echinococcus granulosus sensu lato genotypes infecting humans--review of current knowledge. Int. J. Parasitol.44:9-18.
3-Borji, H., Azizzadeh, M., Afsai,A.2011. An abattoir-based study on the prevalence of hydatidosis in livestock in Mashhad, Iran. J. Helminthol.10: 1-4.
4-Dalimi,A.;Ghamari,Z.;Ghebleh,F. 2006. Epidemiological feature of animal Echinococcosis / hydatidosis in Uromia of West Azarbaijan province, Iran. Pajouhesh & Sazandegi 71:76-81.
5-Dalimi,A., Motamedi,G., Hosseini,M., Mohammadian,B., Malaki,H., Ghamari,Z.2002. Echinococcosis/hydatidosis in western Iran.Vet Parasitol,105:161-171.
6-Eslami,A. 2008 .Veterinary of helminthology, Vol.2 Cestoda. Tehran University Press .
7- Fakhar,M.Sadjjadi,S.M.2007.Prevalence of hydatidosis in slaughtered herbivores in Qom Province, central part of Iran. Vet.Res.Communicat. 31:993-997.
8- Gholami, S., Tanzifi, A., Sharif, M., Daryani, A., Rahimi, M.T., Mirshafiee, S., Sarvi. S. 2018. Demographic aspects of human hydatidosis in Iranian general population based on serology: A systematic review and meta-analysis. Vet World.11:1385-1396.
9- Hajialilo, E., Harandi, M.F., Sharbatkhori, M., Mirhendi, H., Rostami. S.2011. Genetic characterization of Echinococcus granulosus in camels, cattle and sheep from the south-east of Iran indicates the presence of the G3 genotype. J Helminthol. 86:263-70.
10-.Harandi,M.F.Hobbs,R.P.Adams,P.J.Mobedi,I.Morgan-Ryan,U.M.Thompson, R.C.A.2002.Molecular and morphological characterization of Echinococcus granulosus of human and animal origin in Iran. Parasitology .125: 367–373
11-Hazratitappae, Kh., Mousavi, S.J. Barazesh, A. 2011.Prevalence and fertility of hydatid cysts in Slaughtered livestock of Urmia area , Northwest Iran. J.Med. Sci. Uni. Urima. 3:30-32.
12-Hobbs, R.P., Lymbery, A.J., Thompson, R.C. 1990. Rostellar hook morphology of Echinococcus granulosus (Batsch, 1786) from natural and experimental Australian hosts, and its implications for strain recognition. Parasitol. 2:273-81.
13-Hosseini,S.H.1997 Relationship between the prevalence of hydatid cyst and age of sheep , cattle, and camel and the rate of fertility and viability of hydatid cyst. J . Fac .Vet.Med.Teh .Uni 52: 100-104
14-Hosseini, S.H. Eslami, A.1998.Morphological and developmental characteristics of Echinococcus granulosus derived from sheep, cattle and camels in Iran, J. Helminthol. 72:337–341.
15-Ibrahim,M.M.2010. Study of cystic Echinococcosis in slaughterd animal Albaha region Saudi Arabia . Acta Tropica 113: 26-33.
16-.Jamali, R., Ghazanchaei,A., Asgharzadeh,M.2004.Identification and characterization of Echinococcus granulosus by PCR-RFLP technique in Tabriz district. J Parasit Dis,28: 69–72.
17--Karimi,A. Dianatpour,R. 2008. Genotypic and phenotypic characterization of Echinococcus granulosus of Iran. Biotechnol.7: 757–762
18-Kumaratilake,L.M.,Thompson,R.C.A.1984.Morphological characterisation of Australian strains of Echinococcus granulosus,Inter. J. Parasitol. 14:467-477.
19-Latif,A.A.,Tanveer,A.,Riazud-Din,S.,Maqbool,A., Qureshi,A.W.2009. Morphometry of protoscoleces rostellar of Echinococcus granulosus isolates from Punjab,Pakistan, Pak.J. Sci.61:223-228.
20-Moghaddas E, Borji, H., Naghibi, A., Shayan, P., Razmi, G.R. 2015. Molecular genotyping of Echinococcus granulosus from dromedaries (Camelus dromedarius) in eastern Iran. J Helminthol. 89:100-4.
21- Mowlavi, G., Salehi, M., Eshraghian, M., Rokni, M.B., Fasihi-Harandi, M., Mohajeran, E., Salahi-Moghaddam. A.2012. Morphometric differentiation between camel and sheep strains of Echinococcus granulosus using computer image analysis system (CIAS). Asian Pac J Trop Med. 5:58-61.
22- Ponce Gordo, F., Cuesta Bandera C. 1997. Differentiation of Spanish strains of Echinococcus granulosus using larval rostellar hook morphometry. Int J Parasitol. 27:41-9.
23-Rokni, M. 2009. Echinococcosis/hydatidosis in Iran, Iranian. J. Parasitol. 4:1–16
24- Rostami Nejad, ,M., Nazemalhosseini Mojarad, E., Nochi, Z., Fasihi Harandi,M., Cheraghipour,K., Mowlavi,G.R., .Zali,M.R.2008. Echinococcus granulosus strain differentiation in Iran based on sequence heterogeneity in the mitochondrial 12S rRNA gene.J. Helminthol. 82: 343–347.
25-Thompson, R.C.A. 2008. The taxonomy, phylogeny and transmission of Echinococcus. Exp Parasitol. 119: 439–446.
26- Utuk, A. E. Simsek, S. Koroglu, E. P. McManus, D. 2008. Molecular genetic characterization of different isolates of Echinococcus granulosus in east and southeast regions of Turkey, Acta Tropica, 107,192-194
27- Vural, G., Baca, A.U., Gauci, C.G., Bagci, O., Gicik, Y., Lightowlers, M.W. 2008.Variability in the Echinococcus granulosus cytochrome C oxidase 1 mitochondrial gene sequence from livestock in Turkey and a re-appraisal of the G1-3 genotype cluster. Vet Parasitol. 154:347-50.
28-VarcasiaA,. Canu.S, Lightowlers, .W.MScala, A.Garippa.G2006. Cystic echinococcusis in slaughtered sheep in Sardinia (Italy), Veterinary Parasitology. 135,33-38.
29- Varcasia,A. Canu,S. Kogkos,A. Pipia,P. Scala,A. Garippa,G. Seimenis,A.2007. Molecular characterization of Echinococcus granulosus in sheep and goats of Peloponnesus, Greece Parasitol. Res.101: 1135–1139
30 Yakhchali,M.; Mardani,K.2011. The domestic cycle of the parasite Echinococcus granulosus strain variation in the gene amplification nad1 PCR-RFLP method. Iranian. J.Vet 7: 63-68.
31-Yousofi,H.;Hashemzadeh,M.; Aliyari,Z.; Farokhi,E. 2007. Molecular analysis of strains productive sheep hydatid cyst in chaharmahalva Bakhtiary using restriction fragnint lenghth polymorphism, J . Shahrekord Uni .Med. 2:28-33.
32-Zhang. L., Eslami. A., Hosseini, SH., McManus, D.P. 1998. Indication of the presence of two distinct strains of Echinococcus granulosus in Iran by mitochondrial DNA markers. Am. J. Trop. Med. Hyg. 59:171-4.

فایل ها

سابقه مقاله

  • تاریخ دریافت: 11 دی 1398
  • تاریخ بازنگری: 24 اسفند 1398
  • تاریخ پذیرش: 27 اسفند 1398

هم رسانی

ارجاع به این مقاله

آمار