مطالعه اختلافات سرولوژیکی جدایه‌های اورنیتوباکتریوم رینوتراکئال

نوع مقاله: مقاله کامل

نویسندگان

1 استادیار پژوهشی موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، کرج

2 دانشیار پژوهشی موسسه تحقیقات واکسن و سرم سازی رازی، کرج

3 کارشناس ارشد موسسه تحقیقات واکسن وسرم سازی رازی، کرج

چکیده

مطالعه حاضر برای بررسی تنوع آنتی‌ژنیک پنج جدایه‌ی ‌7،32،71،63،65 اورنیتوباکتریوم رینوتراکئال (Ornithobacterium rhinotracheale, ORT) از برخی استان‌های کشور انجام گرفت. تعداد 48 پرنده از جوجه‌های SPF 14 روزه به‌طور تصادفی به 6 گروه جداگانه تقسیم‌شده و با دسترسی آزاد به غذا و آب در قفس‌های جداگانه نگهداری شدند. جداگانه به هر گروه، از هریک از آنتی‌ژن‌های غیرفعال شده با فرمالین حاوی تعداد (CFU 8 10 ×1) باکتری به همراه یاور ناقص فروند، دو مرتبه بافاصله سه هفته  تزریق گردیدند. گروه ششم تنها بافر سالین فسفات در هر مرحله دریافت نمودند. دو هفته بعد، خون‌گیری از تمام پرنده‌ها جهت تهیه نمونه‌های سرمی صورت گرفت. ارزیابی پاسخ ایمنی هومورال و تشخیص تفاوت‌های آنتی‌ژن در بین جدایه‌ها با استفاده از آزمایش الیزا تجاری و آزمون (AGP, Agar gel precipitation)، انجام شد. نتایج الیزا تفاوت در تولید آنتی‌بادی با بالاترین سطح سرمی برای جدایه‌های 7 و 32 (05/0>p) و کمترین تیتر برای جدایه 63 را نشان داد. آزمون AGP نشان داد حداقل یک آنتی‌ژن مشترک بین بیشتر جدایه‌ها (به‌جز جدایه 71) وجود دارد. بعلاوه در AGP واکنشی مشابه بین  این آنتی‌ژن‌ها با سرم حاصل از پرنده SPF ایمن شده با واکسن (ORT,serotype A) مشاهده شد. این تحقیق نشان داد که جدایه‌های مزبور ازلحاظ سرولوژیکی دارای هویت یکسان (به جز 71) و وابسته به سروتیپ A اورنیتوباکتریوم رینوتراکئاله بوده و بین جدایه‌ها ممکن است اختلافی در القای پاسخ ایمنی دیده شود. نتایج این مطالعه می‌تواند در انتخاب بهتر سوش کاندیدای واکسن ORT بومی استفاده شود.

کلیدواژه‌ها

موضوعات


عنوان مقاله [English]

Study of Serological Differences of Ornithobacterium Rhinotracheale Isolates

نویسندگان [English]

  • Abbas Nouri 1
  • Mansour Banani 2
  • Sayed gholamreza Mirzaei 3
1 Department of Avian Diseases, Research & Diagnosis, Razi Vaccine & Serum Research, Institute, ministry of jahad-e-agriculture, research and education deputy, Karaj, Iran
2 Department of Avian Diseases, Research & Diagnosis, Razi Vaccine & Serum Research, Institute, ministry of jahad-e-agriculture, research and education deputy, Karaj, Iran
3 Department of Avian Diseases, Research & Diagnosis, Razi Vaccine & Serum Research, Institute, ministry of jahad-e-agriculture, research and education deputy, Karaj, Iran
چکیده [English]

The present study was conducted to evaluate the antigenic diversity of five ORT (Ornithobacterium rhinotracheale) isolates (7,32,71,63,65) from a few provinces. 48 birds from 14-day-old SPF chicken were randomly divided into 6 separate groups and were kept in separate cages with free access to food and water. Each of the groups were inoculated with formalin inactivated antigens of each isolates containing a  1 × 10 8 CFU, per dose of bacteria along with incomplete fraud’s adjuvant twice within three weeks. The sixth group was injected with saline phosphate buffer. Two weeks post inoculation, all birds were bleeded for the preparation of serum samples. Evaluation of induced humoral immune response and differentiation of antigen diversity among isolates were done using commercial ORT ELISA kit and Agar Gel Precipitation (AGP) tests. Differences in titer were observed by ELISA with the highest serum level for isolates 7 and 32 (P<0.05) and the lowest titer for the 63 isolate.  AGP test showed one common antigen between most isolates (except for isolate 71). In addition, a similar reaction was detected by all the antigens against the serum of SPF chickens previously immunized with a commercial ORT (serotype A) vaccine. Overall this study showed the most isolates were serologically identical (except 71) and associated to the serotype A of ORT in addition to possible variable induction of the immune response by isolates in chickens. The results of this study could help researcher in choosing an ORT candidate for producing a more effective local vaccine.

کلیدواژه‌ها [English]

  • Ornithobacterium rhinotracheale
  • AGP
  • ELISA
  • serotyping
  • SPF chicken

1- Allymehr, M. 2006. Seroprevalence of Ornithobacterium rhinotracheale infection in broiler and broiler breeder chickens in West Azerbaijan Province, Iran. J Vet Med A Physiol Pathol Clin Med 53: 40-42.
2- Amonsin, A., J. F. Wellehan, L. L. Li, P. Vandamme, C. Lindeman, M. Edman, R. A. Robinson and V. Kapur. 1997. Molecular epidemiology of Ornithobacterium rhinotracheale. Journal of clinical microbiology 35: 2894-2898.
3- Asadpour, Y., M. H. Bozorgmehrifard, S. A. Pourbakhsh and M. B. a. S. Charkhkar. 2008. Isolation and Identification of Ornithobacterium rhinotracheale in Broiler Breeder Flocks of Guilan Province, North of Iran. Pakistan Journal of Biological Sciences 11: 1487-1491.
4- Back, A., D. Halvorson, G. Rajashekara and K. V. Nagaraja. 1998. Development of a serum plate agglutination test to detect antibodies to Ornithobacterium rhinotracheale. J Vet Diagn Invest 10: 84-86.
5- Banani, M. 2016. Infection of Ornithobacterium rhinotracheale (ORT) and its signs, importance and pathogenicity in the poultry industry of Iran: a review article. Veterinary Journal (Pajouhesh Sazandegi) 113: 2-16 (In Persian).
6- Banani, M., P. KHaki, H. Goodarzi, J. Vandyousefi and S. Pourbakhsh, A. 2000. Isolation and identification of Ornithobacterium rhinotracheale from a broiler and a pullet flock. Pajouhsh & Sazandegi 46: 106-109 (In Persian).
7- Banani, M., S. A. Pourbakhsh, P. Khaki and G. Moazeni Jula. 2004. Isolation and identification of bacterial agents in commercial chickens suffered from swollen head and face. Iranian Journal of Veterinary Research 5: 49-61. (In Persian).
8- Bock, R., P, M. Freidlin, A. Manoim, A. Inbar, P. Frommer, Vandamme and P. Wilding. 1997. Ornithobacterium rhinotracheale (ORT) associated with a new turkey respiratory tract infectious agent in Israel. Intl Congr World Vet Poult Assoc: 11:120.
9- Chin, R. P. and B. R. Charlton. Section. 2008. Ornithobacteriosis, . 75-76. In: L. Dufour-Zavala ea, editor. A laboratory manual for the isolation, identification, and characterization of avian pathogens,. 5 ed. American Association of Avian Pathologists,. Madison,: Wisconsin,United States.
10- Chin, R. P., P. C. M. van Empel and H. M. Hafez. Section. 2013. Ornithobacterium rhinotracheale infection. In: D.E. JRG., Swayne LR., McDougald LK., Nolan DL., Nair SVL, editors. Diseases of Poultry,. 13 ed. Wiley-Blackwell. Ames.
11- Hafez, H. M. and R. Sting. 1999. Investigations on different Ornithobacterium rhinotracheale "ORT" isolates. Avian diseases 43: 1-7.
12- Keleidari, G. A., M. R. Basami, H. Kavoosi and F. Kordi. 2008. Seroprevalence of Ornithobacterium rhinotracheale in a selected number of broiler and a broiler breeder by the use of ELISA assay in Mashhad. In: Proceedings of the 4th National Symposium of Poultry Disease, Shahrekord: pp. 5–9.
13- Koga, Y. and A. I. Zavaleta. 2005. Intraspecies genetic variability of Ornithobacterium rhinotracheale in commercial birds in Peru. Avian diseases 49: 108-111.
14- Leroy-Setrin, S., G. Flaujac, K. Thenaisy and E. Chaslus-Dancla. 1998. Genetic diversity of Ornithobacterium rhinotracheale strains isolated from poultry in France. Letters in applied microbiology 26: 189-193.
15- M., B., S. A. Pourbakhsh and P. Khaki. 2001. Isolation and identification of Ornithobacterum rhinotracheale from turkey and its antibiotic sensitivity. Proceeding of 4th Congress of Microbiology Shahed University: Tehran, Iran. Pp: 180-181. (In Persian).
16- Mendoza-Espinoza, A., Y. Koga and A. I. Zavaleta. 2008. Amplified 16S ribosomal DNA restriction analysis for identification of Avibacterium paragallinarum. Avian diseases 52: 54-58.
17- Mirzaie, S., M. Hassanzdeh, M. H. Bozorgmehrifard and M. Banani. 2011. Isolation and characterization of Ornithobacterium rhinotracheale in the commercial turkey, quail flocks and domestic pigeons by bacteriological and molecular methods. . Archives Razi Institute 66: 121–127.
18- Schuijffel, D. F., P. C. van Empel, A. M. Pennings, J. P. van Putten and P. J. Nuijten. 2005. Successful selection of cross-protective vaccine candidates for Ornithobacterium rhinotracheale infection. Infect Immun 73: 6812-6821.
19- van Empel, P. 1998. Ornithobacterium rhinotracheale. PhDthesis. Utrecht, Universiteit
20- van Empel, P., H. van den Bosch, P. Loeffen and P. Storm. 1997. Identification and serotyping of Ornithobacterium rhinotracheale. Journal of clinical microbiology 35: 418-421.
21- van Empel, P. C. and H. M. Hafez. 1999. Ornithobacterium rhinotracheale: A review. Avian pathology : journal of the WVPA 28: 217-227.